测定塑料圈中的抗菌素耐药性:不可生物降解微塑料的低风险与可生物降解微塑料的高风险
发布时间:
2026-05-14
本研究通过对比可生物降解与不可生物降解微塑料的原位培养实验,发现可生物降解微塑料在环境中具有更高的抗菌素耐药风险。其通过诱导氧化应激与SOS反应,促进耐药基因水平转移,并在微生物基因组中形成耐药基因、移动遗传元件与毒力因子的多重共定位。这为评估可生物降解塑料的生态安全性、理解塑料圈中耐药基因传播机制提供了新视角。
Determining Antimicrobial Resistance in the Plastisphere: Lower Risks of Nonbiodegradable vs Higher Risks of Biodegradable Microplastics
测定塑料圈中的抗菌素耐药性:不可生物降解微塑料的低风险与可生物降解微塑料的高风险

作者:Gaoyang Luo, Lu Fan, Bin Liang等
期刊:Environmental Science & Technology
时间:2025.04.09
影响因子:11.3
DOI:10.1021/acs.est.5c00246
摘要
本文采用基于丰度的方法和定制的AMR(抗菌素耐药性)风险排名框架(包括抗生素耐药性基因(ARGs)丰度、迁移性和宿主致病性)系统地量化了可生物降解和不可生物降解微塑料介导的AMR风险。研究结果表明,与不可生物降解的塑料相比,可生物降解的微塑料具有更高的AMR风险。关键耐药基因,包括多药耐药基因、杆菌肽耐药基因和氨基糖苷耐药基因占主导地位。机器学习分析发现细胞运动是与AMR风险相关的最重要特征,突出了其在促进ARGs传播中的潜在作用。此外,可生物降解的微塑料促进氧化应激和SOS反应,这可能会增强水平基因转移(HGT)和AMR。宏基因组组装基因组(MAGs)分析揭示了微塑料降解基因、ARGs和毒力因子(VFs)的共定位,进一步支持了可生物降解塑料圈中风险升高的事实。ARGs与移动遗传元件(MGEs)的接近表明微塑性降解过程可能有利于ARGs的迁移。
方法及内容
1 实验设计、样本收集及测序
研究团队在中国深圳的城市河流中进行了原位培养实验,选择了四种类型的原生微塑料(3 - 5 mm),松木用作天然材料对照。微塑料在4个地点的1米深度孵育4周,每种材料类型使用3个重复的不锈钢网袋,共57个重复(45个塑料样品,12个松木对照)。就地记录环境参数,包括温度、pH值、溶解氧和氧化还原电位。孵育后,收集生物膜样品,用无菌河水冲洗,在液氮中速冻,并在- 80°C保存,然后提取DNA。此外,每个地点采集2 L水样,通过0.22 μm微孔膜过滤,保存在- 20°C用于微生物DNA提取。DNA文库由广东美格基因科技有限公司有限公司制备并测序。文库制备按照标准方案进行,随后在Illumina NovaSeq 6000平台上进行双端(150 bp)测序。
2 数据处理、计算分析及统计分析
原始测序读数使用FastQC进行质量控制,使用Flexbar去除测序接头;使用MEGAHIT的meta-sensitive参数敏感预设重新组装高质量的reads;保留超过500 bp的Contigs,并使用Prodigal预测开放阅读框;使用Bowtie2进行读取映射和覆盖估计;使用mOTUs进行分类分析,使用KofamScan对KEGG Orthology 数据库进行功能注释。为研究组间差异,使用Wilcoxon秩和检验和t检验对两两比较进行了差异丰度检验。对于涉及两个以上组的比较,我们应用了单向方差分析(ANOVA)或Kruskal - Wallis检验。流程采用消除测序深度偏差的RPKG标准化,使用CompRanking工作流进行注释。

结果
根据研究结论,可生物降解微塑料的ARGs剖面具有明显差异(图1d),可生物降解微塑料(BD-MPs)比不可生物降解微塑料(nBD-MPs)表现出更高的抗菌素耐药性(AMR)风险(图2j,k),其ARGs丰度显著更高(如多药耐药、氨基糖苷类耐药基因),且通过促进氧化应激和SOS反应(recA等基因上调)增强水平基因转移(HGT),加速AMR传播。在BD-MPs环境中,细胞运动是AMR最强预测因子(图3a-e),BD-MPs中与氧化应激和SOS通路相关的基因显著富集(图5a,d,e)。宏基因组分析显示,BD-MPs上移动遗传元件(MGEs)主导ARGs迁移(如质粒携带ARGs比例达57.55%)(图4e),可移动质粒比例在BD-MPs中显著升高(p<0.05)(图4c),且降解基因、ARGs与毒力因子(VFs)在微生物基因组中频繁共定位(占63.16%)(图6f),形成多重风险枢纽。此外,与BD-MPs相关的几个MAGs在ARGs、MGEs和塑料降解基因之间表现出密切的基因组接近性,这表明生物降解可能会增强HGT和ARGs的传播(图6g)。这些发现表明,生物降解环境可能会选择同时具有ARGs和塑料降解能力的微生物种群,从而促进AMR在塑料圈内的传播。

图1 微塑料上的ARGs分布

图2 塑料圈AMR风险的量化

图3 利用机器学习识别特征代谢途径

图4 流动性分析

图5 塑料圈中ROS和SOS相关基因丰度及其与AMR风险的关系

图6 可生物降解微塑料微生物群中塑料圈微生物群落的分类概况和携带VF的基因组的MAG解析特征,包括ARGs和MGEs的共定位
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