合成生物学
SYNTHETIC BIOLOGY
基于激活诱导性胞苷脱氨酶突变系统筛选纳米抗体技术
什么是纳米抗体？
纳米抗体（Nanobody），是存在于骆驼科动物或鲨鱼等某些软骨鱼类中天然缺失轻链的重链抗体的可变区，直径仅2.5nm，长度为4.2nm。基于VHH单域抗体的特殊结构，纳米抗体兼具了传统抗体与小分子药物的优势，几乎完美克服了传统抗体的开发周期长，稳定性较低，保存条件苛刻等缺陷，逐渐成为新一代治疗性生物医药与临床诊断试剂中的新兴力量。
纳米抗体优点 | 结构基础 |
稳定性高，水溶性强 | 空间结构稳定，变性后可重新折叠，多个亲水基团 |
抗原结合力强 | 丰富的结构多样性，能深入抗原结构间隙 |
组织穿透力强，低脱靶毒性 | 体积小，易于体内代谢清除 |
免疫原性低 | 与人类VH片段有高度同源性 |
易于基因改造，多系统表达 | 结构简单，体积小 |
美格基因基于激活诱导性胞苷脱氨酶突变系统筛选纳米抗体技术
美格基因获得中山大学“基于激活诱导性胞苷脱氨酶的诱导突变蛋白的制备和用途”专利授权，以该专利为基础的基于激活诱导性胞苷脱氨酶突变系统，能够在纳米抗体CDR区上产生大量的突变。将这套系统搭载在酵母细胞上，在培养酵母时对纳米抗体进行持续性突变，并利用酵母细胞表面展示技术，可以获得更高活性的抗体序列。该系统相较于传统羊驼免疫纳米抗体制备过程，具有成本低、可迭代、可并行和周期短的显著优势。现由美格基因全资子公司方舟生物公司实施该项专利技术，用于开发、研制纳米抗体、蛋白制品及相关技术服务。
传统纳米抗体筛选流程
传统纳米抗体筛选技术流程
利用基于激活诱导性胞苷脱氨酶突变系统在酵母中直接构建抗体文库——诱导酵母细胞展示抗体——抗体筛选——测序获得抗体序列——作为子库继续突变迭代。
美格基因纳米抗体筛选技术特点
- 成本低，周期短：纳米抗体库由高突变系统在酵母中产生，无需动物免疫。
- 活性高：纳米抗体经真核细胞翻译后修饰，比常规合成文库更具活性。
- 可迭代：在筛选后富集的酵母细胞里可诱导启动高突变系统，再次进行突变库的制造和下一轮纳米抗体筛选，保证筛选子库库容和多样性。
- 可升级：可对已有纳米抗体序列突变，筛选功能性更强的序列。
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